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CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒

產(chǎn)品信息

 細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒 熒光探針 細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒 熒光探針

產(chǎn)品描述

CFDA SE（CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit）是一款基于熒光探針CFDA, SE，用于細(xì)胞增殖檢測和細(xì)胞熒光示蹤的檢測試劑盒。此方法目前廣泛替代MTT法或者3H-胸腺嘧啶核苷摻入法（3H-thymidine incorporation）等細(xì)胞增殖檢測方法。本試劑盒包含粉末形式的CFDA, SE探針，細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)的溶劑，以及細(xì)胞標(biāo)記液，使用方便，操作簡單。按照每個(gè)樣本的標(biāo)記體積為1ml來算。500T 的可以檢測500個(gè)樣品

CFDA, SE，英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester，CAS NO. 150347-59-4，是一種穩(wěn)定的、細(xì)胞膜滲透性的非熒光染料，由兩個(gè)醋酸基團(tuán)和一個(gè)琥珀酰亞胺酯（SE）官能團(tuán)組成的一個(gè)熒光分子。一旦主動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞，其醋酸基團(tuán)被胞內(nèi)酯酶切割，生成熒光素酯CFSE。CFSE具有高度熒光，且能通過其琥珀酰亞胺酯基團(tuán)共價(jià)結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)的蛋白氨基基團(tuán)。正是這個(gè)共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)，CFSE能夠極其長期的保留在細(xì)胞內(nèi)，長達(dá)數(shù)個(gè)月。另外，歸因于這一穩(wěn)定連接，一旦染料進(jìn)入細(xì)胞，不會(huì)轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。無活力細(xì)胞仍然是非熒光。而活細(xì)胞一旦分化，CFSE能夠很均勻的分散到子細(xì)胞中，每分裂一次子代細(xì)胞約能得到親本細(xì)胞1/2的熒光強(qiáng)度，因此，通過流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度的檢測，能夠依次分選出未分裂細(xì)胞，分裂一次的細(xì)胞（1/2熒光強(qiáng)度），分裂兩次的細(xì)胞（1/4熒光強(qiáng)度），分裂三次的細(xì)胞（1/8熒光強(qiáng)度），以及以此類推其他分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSE可以檢測分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。

CFSE廣泛用于細(xì)胞zen殖和體內(nèi)細(xì)胞示蹤研究。CFSE的zui大激發(fā)和發(fā)射波長分別為492nm和517nm，標(biāo)記細(xì)胞后呈綠色熒光。使用流式細(xì)胞儀檢測可用FL1檢測通道。也能用熒光顯微鏡觀察，使用FITC濾片。

產(chǎn)品包裝

注意事項(xiàng)

1）CFDA SE溶劑在低溫（如4℃，冰浴）等條件下會(huì)凝固而粘在離心管底、管壁或蓋子上，可將其置于25℃溫育片刻直至全部融解后使用。

2）CFDA SE粉末經(jīng)溶劑溶劑配制成儲(chǔ)存液后一個(gè)月內(nèi)用完，zui多不超過三個(gè)月。因CFDA SE容易被水解，并在水溶液中變質(zhì)。使用過程中盡量避免接觸水。而在標(biāo)記過程中接觸到水是在允許范圍內(nèi)。

3）熒光染料均存在淬滅問題，操作和儲(chǔ)存過程中需注意避光，以減緩熒光淬滅。

4）為了您的an全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.  CFDA SE儲(chǔ)存液（1000X）制備

2.  CFDA SE標(biāo)記液（1X）制備

3.  染色步驟 

常見應(yīng)用和數(shù)據(jù)示例：

根據(jù)熒光信號(hào)的稀釋來檢測細(xì)胞zen殖和分化（示蹤）（Cell proliferation and cell division by Dye Dilution Method），此方法主要用來體內(nèi)外檢測淋ba細(xì)胞（T細(xì)胞和B細(xì)胞）的增殖，也能用來檢測NK細(xì)胞，成纖維細(xì)胞甚至細(xì)菌。也有用來研究可移植造血干細(xì)胞的增殖。

示例1（體外）.

Fig 1. Murine CD4+ lymphocytes, labelled with CDFA-SE were cultured with antigen-presenting cells with different peptides to stimulate either the memory or the memory and naïve cells. Up to five cell divisions can be observed.